Горис А.П., Зарубина Е.Г., Москвин С.В.
Зависимость деформируемости эритроцитов от возраста человека
Горис А.П., Зарубина Е.Г., Москвин С.В.
НОУ ВПО Самарский медицинский институт «РЕАВИЗ»
В работе представлены данные исследования деформируемости мембраны эритроцитов и их связи со структурными перестройками мембран клеток в зависимости от возраста. Была исследована кровь практически здоровых людей в 4 возрастных группах от 20 до 59 лет. Кровь получали путем венепункции в пробирки, содержащие ЭДТА в качестве антикоагулянта. Для измерения деформируемости эритроцитов методом «лазерный пинцет» приготавливали рабочую суспензию эритроцитов, которую получали с помощью трехкратной отмывки раствором низкой ионной силы Liss (производитель ООО «Гематолог») с режимом центрифугирования при 2700 об./мин в течение 8 мин. Определения микровязкости мембран по флюоресценции зонда пирена проводили по методу Г.Е. Добрецова. Для проведе- ния исследований белков мембраны эритроцитов методом электрофореза их трижды отмывали по методу I. Tannert. В результате проведенных исследований были получены подтверждения о наличии выраженной дезорганизации липидного спектра мембраны эритроцитов у практически здоровых людей пожилого возраста. В мембранах эритроцитов пожилых людей увеличивается вязкость липидного бислоя, что подтвердилось достоверным (p < 0,001) уменьшением индекса микровязкости мембран клеток. По мере физиологического старения происходят изменения и в белковом слое мембраны эритроцитов, а именно возрастает содержание высокомолекулярных белков спектринов. То, что происходит повышение жесткости цитоскелета с увеличением возраста, подтверждается при воздействии на красные клетки крови лазерным лучом при разных силах тока в течение определенного времени. Увеличение силы тока и времени воздействия приводило к снижению деформируемостимембраны эритроцитов и увеличению процента гемолизированных клеток в ряду I–II–III–IV.
Ключевые слова: деформируемость эритроцитов, эритроцитарная мембрана, липидный бислой, лазерный пинцет.
Dependence of Erythrocyte deformability on the human age
Goris A.P., Zarubina E.G., Moskvin S.V.
The present work discusses findings on the deformability of erythrocyte membranes and its correlation with the structural changes in cellular membranes depending on the patient’s age. The blood taken from practically healthy subjects aged 20–59 and divided into 4 groups was examined. The blood was obtained by the venipuncture technique into tubes containing EDTA as an anticoagulant. To measure the erythrocyte deformability using the «laser pincers» technique the researchers prepared a working erythrocyte suspension which was washed three times with the solution of low ion strength Liss (manufactured by Hematolog Ltd). Centrifugation was done under 2 700 r/min for 8 minutes. The membrane microviscosity was determined with the fl ourescent level of pyrene probe by Dobretzov’s technique. For studying erythrocyte membrane proteins with the electrophoresis technique red blood cells were washed three times by I. Tannert’s technique. The results have confi rmed that there is a severe disorganization of the lipid spectrum in red blood cell membranes in practically healthy people of elderly age. In the erythrocyte membranes in elderly people one can see the increase of viscosity in the lipid bilayer what was confi rmed by a signifi cant (p < 0.001) decrease of the microviscosity index in cellular membranes. With physiological aging one can also see changes in the membrane protein layer in red blood cells, namely, there is an increase of high molecular protein level in the spectrins. The cytoskeleton rigidity is increasing with age, and one can confi rm it while irradiating red blood cells with laser beam of various power for a defi nite period of time. The increase of current strength and exposure time led to the decrease of RBC membrane deformability and to the increase of hemolyzed cells in series I–II–III–IV.
Кey words: erythrocyte deformability , erythrocyte membrane, lipid bilayer, laser pincers.
